CHO中国仓鼠卵巢细胞(批次6001)
CHO中国仓鼠卵巢细胞的全面解析
CHO细胞,即中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary cells),是生物医学和生物技术领域中广泛应用的一种哺乳动物细胞系。本文将详细介绍CHO细胞的来源与种类、细胞系特性、培养条件、应用领域、认证与鉴定以及技术支持等方面的信息。
细胞来源与种类
CHO细胞最早在20世纪60年代由美国的Theodore T. Puck和Philip I. Marcus从中国仓鼠的卵巢中分离得到。自那时起,CHO细胞被广泛应用于生物制药、基因工程和细胞生物学研究中。根据不同的研究需求,CHO细胞已经衍生出多种亚系,包括CHO-K1、CHO-S、DG44等。
CHO-K1细胞
CHO-K1是最常用的CHO细胞系之一,具有快速生长和高效蛋白表达的特点,常用于重组蛋白的生产。
CHO-S细胞
CHO-S细胞是悬浮培养的CHO细胞系,适合于大规模生物反应器中的悬浮培养,用于工业化生产。
DG44细胞
DG44细胞系缺乏二氢叶酸还原酶(DHFR)基因,常用于选择性表达系统,通过转入含有DHFR基因的载体来筛选出高效表达的细胞株。
细胞系特性
形态学特征
CHO细胞在显微镜下呈现为多边形或椭圆形,具有明显的核和胞质结构。在贴壁培养条件下,CHO细胞呈铺展状,细胞间存在紧密连接。
基因突变信息
CHO细胞系中存在多种基因突变,这些突变有助于细胞对药物和化学物质的耐受性。例如,CHO-K1细胞系中缺乏Gln1基因,使其依赖外源谷氨酰胺生长。
基因表达
CHO细胞广泛用于外源基因的表达,具有高效的转录和翻译机制。通过基因工程手段,可以在CHO细胞中表达各种重组蛋白和抗体。
蛋白表达
CHO细胞能够高效表达复杂的哺乳动物蛋白,包括糖基化修饰的蛋白质,这使得其成为生产生物制药的首选细胞系。
STR位点数据
短串联重复序列(STR)分析是细胞系鉴定的重要手段。CHO细胞的STR位点数据有助于确保细胞系的纯度和真实性,避免实验中的交叉污染。
培养条件
CHO细胞的培养条件包括培养基、温度、CO2浓度和培养方法等。常用的培养基有Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM)、Ham’s F-12和专用的CHO细胞培养基。培养温度一般为37℃,CO2浓度为5%。培养方法包括贴壁培养和悬浮培养,具体选择取决于实验目的。
应用领域
CHO细胞在多个领域有广泛的应用:
生物制药
CHO细胞是生产单克隆抗体、疫苗和重组蛋白的重要宿主细胞。其高效的蛋白表达能力和哺乳动物特有的翻译后修饰机制,使得其成为生物制药工业的主力军。
基因工程
CHO细胞广泛用于基因敲除、基因编辑和基因功能研究。例如,利用CRISPR-Cas9技术在CHO细胞中进行基因敲除实验,研究基因功能和疾病机制。
毒理学研究
CHO细胞被广泛用于药物和化学物质的毒性测试,其稳定的基因组和可控的培养条件使其成为理想的细胞模型。
认证与鉴定
为确保CHO细胞系的质量和安全性,必须进行严格的认证与鉴定。主要包括以下几个方面:
细胞鉴定
通过STR分析、细胞形态学观察和分子生物学技术对细胞系进行鉴定,确保细胞的纯度和来源的正确性。
微生物检测
定期检测细胞培养物中的细菌、真菌和支原体等污染物,确保细胞的无菌状态。
基因稳定性检测
通过测定细胞的染色体数目和基因突变情况,评估细胞系的基因稳定性。
技术支持
为了帮助研究人员更好地利用CHO细胞进行研究和生产,许多公司和科研机构提供全面的技术支持,包括:
培养基和试剂
提供专用的CHO细胞培养基和相关试剂,优化细胞生长条件和表达效率。
细胞库服务
提供高质量的CHO细胞系和相关的细胞库服务,确保细胞的来源和质量。
实验指导
提供CHO细胞培养、转染、筛选和分析的技术指导,帮助研究人员解决实验中的实际问题。
培训课程
组织相关的培训课程和研讨会,分享最新的研究进展和技术应用,提升研究人员的实验技能。
结论
CHO细胞作为一种重要的哺乳动物细胞系,广泛应用于生物制药、基因工程和细胞生物学等领域。通过严格的认证与鉴定、优化的培养条件和全面的技术支持,CHO细胞为生物医学研究和产业化生产提供了重要的保障。了解CHO细胞的来源、特性、应用和支持服务,有助于更好地利用这一重要的研究工具,推动科学和技术的进步。