NIH-3T3 小鼠胚胎成纤维细胞(批次6001)
NIH-3T3 小鼠胚胎成纤维细胞:全面指南
细胞来源与种类
NIH-3T3是从小鼠(Mus musculus)胚胎组织中分离出的成纤维细胞系,由美国国立卫生研究院(NIH)开发。作为一个标准的实验室细胞系,NIH-3T3在研究中被广泛应用,尤其在癌症、生物化学和分子生物学领域。
细胞系特性
形态学特征:
NIH-3T3细胞呈现纺锤形或星形,贴壁生长,形态均匀,具有典型的成纤维细胞特征。
基因突变信息:
NIH-3T3细胞经过多代传代培养,可能积累了一些基因突变。然而,这些细胞通常被认为是基因组稳定的,适合于长时间实验。
基因表达:
该细胞系广泛表达成纤维细胞相关的基因,如胶原蛋白(collagen)、纤维连接蛋白(fibronectin)和转化生长因子-β(TGF-β)。此外,NIH-3T3细胞也被用来研究原癌基因和抑癌基因的表达和功能。
蛋白表达:
在蛋白质水平上,NIH-3T3细胞表达丰富的细胞外基质蛋白和细胞骨架蛋白,如α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(vimentin)。
STR位点数据:
短串联重复序列(STR)分析是细胞系鉴定的重要工具。NIH-3T3的STR位点数据确保了其遗传身份的唯一性,便于研究者确认其细胞系的纯度和一致性。
培养条件
培养基:
NIH-3T3细胞通常在含有10%胎牛血清(FBS)的Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM)中培养。培养基应补充L-谷氨酰胺、青霉素和链霉素,以维持细胞的健康生长。
温度和CO2浓度:
细胞培养应在37°C、5% CO2的恒温培养箱中进行,以模拟体内环境,确保细胞的最佳生长状态。
传代与分离:
当细胞汇合度达到80-90%时,应进行传代。使用0.25%的胰蛋白酶-EDTA溶液消化细胞,轻轻吹打分离细胞,然后进行稀释接种。
应用领域
癌症研究:
NIH-3T3细胞常用于癌症研究,特别是原癌基因和抑癌基因的功能分析。例如,通过转染Ras或Myc基因,研究者可以观察这些基因在细胞增殖和肿瘤形成中的作用。
基因功能研究:
该细胞系是研究基因功能和信号通路的理想模型。通过基因敲除或过表达实验,可以解析特定基因在细胞生长、分化和凋亡中的角色。
药物筛选:
NIH-3T3细胞常用于药物筛选和毒性测试。研究者可以评估新药对细胞增殖和存活的影响,为药物开发提供基础数据。
认证与鉴定
细胞认证:
使用STR分析、基因表达谱和蛋白质组学方法对NIH-3T3细胞进行认证,确保其与标准细胞系一致。
定期检测:
定期进行细菌、真菌和支原体污染检测,确保细胞培养环境的无菌性和细胞系的纯度。
技术支持
培训与咨询:
提供详细的细胞培养指南和技术培训,帮助研究者掌握NIH-3T3细胞的操作技能。专家团队提供一对一的技术咨询,解决实验中遇到的问题。
资源与文献:
提供丰富的文献资源和实验数据,支持研究者进行深入的科学研究。通过在线数据库和期刊获取最新的研究进展和应用案例。
总结
NIH-3T3小鼠胚胎成纤维细胞作为一种经典的细胞系,在基础研究和应用研究中发挥了重要作用。其稳定的基因组、广泛的基因和蛋白表达特性使其成为研究癌症、基因功能和药物筛选的理想模型。通过严格的培养条件和认证方法,研究者可以确保实验结果的可靠性和可重复性。无论是在细胞生物学还是分子生物学领域,NIH-3T3细胞都为科学研究提供了宝贵的工具和平台。